【检验方法】
以操作一个 T25 flask 为例:
1. 染色前,将 Adipo-Staining A (C37A30020)与 Adipo-Staining B (C37A40010) 按 3:2 的体积比混合, 即为染色工作液 (Staining Solution)。每次使用现用现配,3 小时内使用。
2. 吸弃分化培养基,加入 1 ml DPBS (BI 02-020-1A)轻轻润洗培养瓶底面。
3. 吸弃 DPBS,加入 3 ml Adipo-Fixation (C37A10020),轻轻晃动培养瓶,使底面浸润均匀。室温下 静置 30 分钟。
4. 吸弃 Adipo-Fixation ;加入 3 ml Adipo-Wash I (C37A20050),润洗底面,静置 2-3 分钟。
5. 吸弃 Adipo-Wash I,加入 3 ml Staining Solution,均匀浸润底面,室温静置染色 30 分钟。
6. 吸弃 Staining Solution,加入 3 ml Adipo-Wash II (C37A50050),润洗底面。
7. 吸弃 Wash II,重复第 6 步,再次漂洗细胞(如若上清依然很红,可延长漂洗时间或再漂洗一次。注意:不要把细胞冲下来)。
8. 加入 1 ml Adipo-Inspection (C37A60010),置于显微镜下观察、拍照。
【检验结果的解释】
在显微镜下,可观察到脂肪细胞内的油脂滴与油红染料结合呈现出明显的红色或深红色 (如下图所示)。 被染色细胞的数量和染色的深度会受到多种因素的影响,例如:细胞类型、细胞代数、分化时间和培养条 件等。
【检验方法的局限性】 本试剂盒用于成脂分化后的定性染色验证,并不具备定量分析的能力。
【注意事项】 本品仅用于科研,不用于临床治疗,严禁内服,不能用嘴吸液。
1. 试剂包装如有破损,严禁使用。
2. 操作人员在检验时应做好防护。
3. 操作人员万一与皮肤、粘膜接触,请立即用自来水冲洗。
4. 禁止使用超出规定有效期的产品。
【生产地址/住所】
中国上海自由贸易试验区祖冲之路 1505 弄 80 号 12 幢 3 楼 C,D 区
【生产、售后服务单位】 上海逍鹏生物科技有限公司
【说明书批准及修改日期】
2016 年 11 月 8 日