【产品名称】
通用名称：间充质干细胞软骨分化染色试剂盒
货号：C37B00150
英文名称：MSC Chondro-Staining Kit
Cat.C37B00150
【包装规格】
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试剂名称
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储存条件
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性状
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货号
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规格
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Chondro-Fixation
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2~8℃
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无色透明液体
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C37B10020
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一瓶(20 ml)
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Chondro-Wash I
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2~8℃
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无色透明液体
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C37B20050
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一瓶(50 ml)
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Chondro-Staining
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2~8℃
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蓝色液体
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C37B30020
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一瓶(20 ml)
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Chondro-Wash II
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2~8℃
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无色透明液体
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C37B40050
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一瓶(50 ml)
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Chondro-Inspection
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2~8℃
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无色透明液体
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C37B50010
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一瓶(10 ml)
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适用于间充质干细胞软骨分化后的细胞染色，尤其适合作为BI MSC go Chondrogenic XFTM( BI 05-220-1B & 05-221-1D)软骨分化后的染色验证之用。
【检验原理】
阿尔新蓝8GX(Alcian Blue 8GX) 是阿尔新蓝 (Alcian Blue) 家族的一种，广泛用于酸性多糖 (acidic polysaccharides) 的染色，例如软骨 (cartilages) 或其他组织中的糖胺聚糖 (glycosaminoglycans) 以及细胞分泌的外被多糖 (glycocalyx) 等。
在软骨诱导分化作用下，间充质干细胞 (MSC, Mesenchymal Stem Cell) 会被诱导成为软骨细胞(chondrocytes)。软骨细胞外具有一层富含蛋白多糖 (aggrecan) 的基质，是软骨分化的标志物，可被阿尔新蓝染成蓝色或蓝绿色。软骨被染色的深度会受到多种因素的影响，例如，细胞类型、细胞代数、分化时间和培养条件等。
【主要组成成分】
主要成分为阿尔新蓝 (Alcian Blue)。
【适应范围】
间充质干细胞软骨分化后的染色验证
【储存条件及有效期】
贮存在2-8℃，有效期为1年
【生产日期与失效日期】
见产品外包装
【使用仪器】
培养瓶、移液管和显微镜
【样本要求】
待检的样本应为间充质干细胞软骨分化后的软骨细胞。推荐使用BI MSC go Chondrogenic XFTM进行软骨分化诱导。
【检验方法】
以操作一个T25 flask为例：
1. 吸弃分化培养基，加入1 ml DPBS (BI 02-020-1A) 轻轻润洗培养瓶底面。
2. 吸弃DPBS，加入3 ml Fixation solution (C37B10020)，轻轻晃动培养瓶，使底面浸润均匀。室温下30 分钟。
3. 吸弃Fixation solution ；加入3 ml Wash I (C37B20050)，润洗细胞，静置2-3分钟。
4. 吸弃Wash I，加入3 ml Staining Solution (C37B30020)，底面浸润均匀，室温避光染色过夜。
5.吸弃Staining Solution，加入3 ml Wash II (C37B40050)，润洗细胞。
6. 吸弃Wash II，重复第5步，再次漂洗细胞(如若上清依然很蓝，可延长漂洗时间或再漂洗一次。注意不要把细胞冲下来)。
7. 加入1 ml Inspection Solution (C37B50010)，置于显微镜下观察、拍照。
【检验结果的解释】
在显微镜下，可观察到软骨细胞被阿尔新蓝染成蓝色 (如下图所示)。染色的深度会受到多种因素的影响，例如：细胞类型、细胞代数、分化时间和培养条件等。
【检验方法的局限性】
本试剂盒用于软骨分化后的定性染色验证，并不具备定量分析的能力。
【注意事项】
1. 本品仅用于科研，不用于临床治疗，严禁内服，不能用嘴吸液。
2. 试剂包装如有破损，严禁使用。
3. 操作人员在检验时应做好防护。
4. 操作人员万一与皮肤、粘膜接触，请立即用自来水冲洗。
5. 禁止使用超出规定有效期的产品。
【生产地址/住所】
中国上海自由贸易试验区祖冲之路1505弄80号12幢3楼C，D区
【生产、售后服务单位】
上海逍鹏生物科技有限公司
【说明书批准及修改日期】
2016年11月8日
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